TE-Puffer ist ein biochemischer Puffer, der aus einer wässrigen Lösung von TRIS und EDTA besteht.

Eigenschaften

TE-Puffer enthalten meist eine Konzentration an TRIS zwischen 10 und 100 mM und einer Konzentration von EDTA zwischen 5 und 10 mM. Das EDTA wirkt neben der Einstellung des pH-Werts auf 7 bis 8 zusätzlich als Chelator für zweiwertige Kationen wie z. B. Calcium-, Magnesium- und Zinkionen, die Cofaktoren für verschiedene abbauende Enzyme wie Nukleasen und Metalloproteasen sind, wodurch diese gehemmt werden. Daher eignet sich TE-Puffer als Lagerlösung für DNA, z. B. nach einer DNA-Reinigung. Der EDTA-Anteil hemmt auch verschiedene andere DNA-modifizierende Enzyme mit divalenten Kationen wie DNA-Polymerasen, weshalb meistens die DNA und somit auch das EDTA vor einer Polymerasekettenreaktion oder einer isothermalen DNA-Amplifikation mit bidestilliertem Wasser unter 1 mM EDTA verdünnt wird, da die typische Magnesiumionenkonzentration dort bei 2 bis 3 mM liegt und weniger als 1 mM EDTA genügend Magnesiumionen übrig lässt.

Eine Modifikation des TE-Puffers ist der TSE-Puffer, der zusätzlich Natriumchlorid enthält. Ähnlich zum TE-Puffer zusammengesetzte Puffer sind der TAE-Puffer und der TBE-Puffer, die zur Agarose-Gelelektrophorese verwendet werden.

Literatur

  • Friedrich Lottspeich, Joachim W. Engels, Solodkoff Zettlmeier Lay: Bioanalytik. 3. Auflage, Spektrum, Heidelberg 2012, ISBN 978-3-8274-0041-3.
  • Cornel Mülhardt: Der Experimentator: Molekularbiologie/Genomics. Sechste Auflage. Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg 2008, ISBN 3-8274-2036-9.
  • J. Sambrook, T. Maniatis, D. W. Russel: Molecular cloning: a laboratory manual. 3rd edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001, ISBN 0-87969-577-3.

Einzelnachweise

  1. ↑ N. Yagi, K. Satonaka, M. Horio, H. Shimogaki, Y. Tokuda, S. Maeda: The role of DNase and EDTA on DNA degradation in formaldehyde fixed tissues. In: Biotechnic & histochemistry : official publication of the Biological Stain Commission. Band 71, Nummer 3, Mai 1996, S. 123–129, PMID 8724437.
  2. ↑ K S Ross, N E Haites, K F Kelly: Repeated freezing and thawing of peripheral blood and DNA in suspension: effects on DNA yield and integrity. In: Journal of Medical Genetics. 27, 1990, S. 569, doi:10.1136/jmg.27.9.569.
This article is issued from Wikipedia. The text is licensed under Creative Commons - Attribution - Sharealike. Additional terms may apply for the media files.